disertacija
Utjecaj inhibitora glutation S – transferaze na produkciju aflatoksina plijesni Aspergillus flavus

Bojan Šarkanj (2014)
Sveučilište Josipa Jurja Strossmayera u Osijeku
Prehrambeno-tehnološki fakultet Osijek
Zavod za primijenjenu kemiju i ekologiju
Katedra za biokemiju i toksikologiju
Podaci o radu
NaslovUtjecaj inhibitora glutation S – transferaze na produkciju aflatoksina plijesni Aspergillus flavus
AutorBojan Šarkanj
Voditelj/MentorTomislav Klapec
Sažetak rada
Glutation S-transferaza (GST) je enzim s višestrukom funkcijom kojim se eukarioti mogu braniti od štetnog djelovanja metabolički aktiviranih aflatoksina, ali i reaktivnih vrsta kisika. Utvrđeno je da se kod plijesni povećava aktivnost GST-a kod povećane produkcije aflatoksina. Cilj ovog rada je bio ispitivanje utjecaja odabranih inhibitora ligandinske i katalitičke domene GST-a u stanici plijesni Aspergillus flavus na biosintezu aflatoksina. Rezultati su pokazali da inhibitori GST-a inhibiraju i produkciju aflatoksina u mikrobiološkoj podlozi u in vitro uvjetima kod svih ispitivanih koncentracija (10; 1; 0,1; 0,01 ppm), ali plijesni preživjele na podlozi s dodanim inhibitorima, imaju povišenu aktivnost GST-a, glutation reduktaze te katalaze. Ujedno, utvrđeni su dodatni sekundarni metaboliti koje ova plijesan proizvodi na ispitivanoj mikrobiološkoj podlozi LC-ESI-MS/MS analizom (QTrap). Uz osnovne intermedijere aflatoksina detektirane su ciklopijazonična, 3-nitropropionska te kojična kiselina Podešeni su odgovarajući parametri za primjenu ultrazvuka kao sigurnije i jeftinije metode razbijanja stanica plijesni. Također je praćena ekspresija regulatornih gena za biosintezu aflatoksina (aflR i aflS), pri čemu uz dodatak inhibitora GST-a dolazi do smanjenja ekspresije regulatornih gena te posljedične redukcije biosinteze aflatoksina.
Ključne riječiplijesni aflatoksini Aspergillus flavus inhibitori glutation S – transferaze antiaflatoksikogeni učinak LC-MS/MS RT-PCR
Naslov na drugom jeziku (engleski)Effect of glutathione S – transferase inhibitors on aflatoxin production by Aspergillus flavus
Povjerenstvo za obranuIvan Kosalec (predsjednik povjerenstva)
Tomislav Klapec (član povjerenstva)
Ivica Strelec (član povjerenstva)
Daniela Čačić Kenjerić (član povjerenstva)
Ustanova koja je dodijelila akademski/stručni stupanjSveučilište Josipa Jurja Strossmayera u Osijeku
Prehrambeno-tehnološki fakultet Osijek
Ustrojstvena jedinica niže razineZavod za primijenjenu kemiju i ekologiju
Katedra za biokemiju i toksikologiju
MjestoOsijek
Država obraneHrvatska
Znanstveno područje, polje, granaBIOTEHNIČKE ZNANOSTI
Prehrambena tehnologija
Kemija hrane
UDK615
PRIMIJENJENE ZNANOSTI. MEDICINA. TEHNIKA. TEHNOLOGIJA
Farmakologija. Terapeutika. Toksikologija
Vrsta studijasveučilišni
Stupanjposlijediplomski doktorski
Naziv studijskog programaPrehrambeno inženjerstvo
Akademski / stručni nazivdoktor/doktorica znanosti, područje biotehničkih znanosti, polje prehrambena tehnologija
Kratica akademskog / stručnog nazivadr. sc.
Vrsta radadisertacija
Jezik hrvatski
Datum obrane2014-06-06
Sažetak rada na drugom jeziku (engleski)
Glutathione S-transferase (GST) is used in eukaryotic cell as defence enzyme from harmful effect of metabolically activated aflatoxin form. It is known that GST is positively correlated with aflatoxin biosynthesis. The aim of this thesis is to determine the effect of several GST inhibitors (both catalytic and ligand site) on aflatoxin production n in A. flavus. Results have shown that GST inhibitors inhibit also the aflatoxin production at all tested concentrations (10; 1; 0.1; 0.01 ppm) in vitro on microbiological medium, but survived cells have higher GST, glutathione reductase and catalase activity. Also the knowledge on A. flavus secondary metabolites produced on GMS medium has been expanded by LC-ESI-MS/MS (QTrap) analysis. In addition to basic aflatoxin biosynthesis pathway intermediates, cyclopiazonic acid, 3-nitropropionic acid, and kojic acid were detected. Ultrasonic disintegration method was also adjusted for mycelium as a safer and cheaper alternative of cell disruption. The expression of aflatoxin biosynthesis regulatory genes (aflR and aflS) was monitored and a lower expression followed addition of GST inhibitorsresulting in a lower aflatoxin biosynthesis rate.
Ključne riječi na drugom jeziku (engleski)moulds aflatoxins Aspergillus flavus glutathione S – transferase inhibitors antiaflatoxigenic effect LC-MS/MS RT-PCR
Opseg257 str.; 30 cm
Verzijaobranjena verzija
Vrsta resursatekst
Prava pristupaRad dostupan samo djelatnicima i studentima matične ustanove
Uvjeti korištenja radahttp://rightsstatements.org/vocab/InC/1.0/
URN:NBNhttps://urn.nsk.hr/urn:nbn:hr:109:619825
PohranioSanda Hasenay